酶標(biāo)儀是對酶聯(lián)免疫檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)醫(yī)療設(shè)備，廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中。酶標(biāo)儀分類方式一般可以按照濾光方式的不同和功能的不同進(jìn)行劃分。酶標(biāo)儀按照濾光方式的不同可分為：濾光片式的酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。

酶標(biāo)儀濾光片原理:

濾光片是光學(xué)玻璃片鍍制光學(xué)膜層。當(dāng)加入光學(xué)膜層后，關(guān)于光的干涉原理，濾光片的折射率發(fā)生了變化，使濾光片對波長的通過有了變化。例如一個(gè)485/20nm的濾光片可以讓475nm到495nm波長的光通過，在這個(gè)波長范圍以外的光就會(huì)被擋住和吸收。

在酶標(biāo)儀內(nèi)，光源會(huì)從氙燈或鹵鎢燈發(fā)出，通過特定的濾片，把不需要的波長隔開，然后再照射到樣本中。樣本中的熒光染料會(huì)被激發(fā)，放出發(fā)射光，再透過特定的濾片把雜光隔開，然后被檢測器收集。這就是濾光片系統(tǒng)酶標(biāo)儀的熒光檢測過程。

酶標(biāo)儀光柵的原理：

為解決濾光片系統(tǒng)不可隨時(shí)改變波長的問題，光柵型酶標(biāo)儀就應(yīng)運(yùn)而生。它是使用物理性衍射光柵原理在不同的角度把白光光源分開成獨(dú)立的波長，之后再經(jīng)過一系列的狹縫把已選取的激發(fā)波長分出來，并照射到樣本上。樣本的發(fā)射光也被同樣的原理去分隔出需要的波長，最后被檢測器接收和量度。

光柵和濾光片的區(qū)別比較

a、酶標(biāo)儀光的純度區(qū)別比較

     光電檢測以采用純度高的光為佳，但不管采用哪種分光器，都不可能得到絕對純的光。

     1、光柵：就光柵分光后的一點(diǎn)而言，光是純的，但由于透光孔具有一定寬度，比色皿所接受的光，是一個(gè)在指定波長附近波段上的等強(qiáng)的光。

     2、濾光片：經(jīng)濾光片分光后，通過透光孔被比色皿所接受的光也是一個(gè)波段，但在指定波長上光的強(qiáng)度最高，呈正態(tài)分布。

b、酶標(biāo)儀光的穩(wěn)定性區(qū)別比較

    1、光柵：棱鏡或者光柵片的繞軸旋轉(zhuǎn)，由于不可避免的機(jī)械誤差，并且小角度的偏差經(jīng)過2-3次反射，會(huì)造成很大的偏差，造成波長的不穩(wěn)定。另外光柵是窄縫，其能量也會(huì)很弱，小的檢測電壓信號(hào)為了獲得大的電壓值，必須以大倍數(shù)放大，這樣誤差也會(huì)被放大，會(huì)造成檢測的不穩(wěn)定

    2、濾光片：由于從同一濾光片上每一點(diǎn)透過的光的波長都是相同的，每個(gè)位置是通過光偶準(zhǔn)確定位，不受儀器本身機(jī)械誤差的影響，所以，光強(qiáng)經(jīng)會(huì)聚后，能量很高，電壓信號(hào)也會(huì)相對強(qiáng)，主流光很強(qiáng)，其它雜光的影響就會(huì)很弱很弱，可以忽略到不計(jì)，誤差也會(huì)很小，光是穩(wěn)定的，檢測相對很穩(wěn)定。

c、酶標(biāo)儀設(shè)備后期維護(hù)區(qū)別

  1、光柵： 一旦出現(xiàn)螺絲松動(dòng)，傳動(dòng)誤差，更換燈泡，造成中心波長偏移，那一般很難再調(diào)整回合適位置，必須由專業(yè)廠家來用專業(yè)設(shè)備調(diào)試完成，事實(shí)上國內(nèi)大多數(shù)用戶因?yàn)闆]有得到這方面的培訓(xùn)與告知，所以基本用了一年以后，發(fā)生了偏差也不會(huì)去找廠家去校準(zhǔn)了。

  2、濾光片：結(jié)構(gòu)簡單，便于維護(hù)。只要稍加培訓(xùn)即可完成維護(hù)。

d、酶標(biāo)儀儀器檢測靈敏度區(qū)別

1.濾光片具有非常好的透光率 (可高于85%)，也就是說光能量的損失比較少。如下圖(圖1)，在一個(gè)熒光檢測中，經(jīng)過濾光片進(jìn)入樣本的激發(fā)光和從樣本透過濾光片進(jìn)入檢測器的發(fā)射光都只有少量的損失(大約10%)。光的損失較少，光的能量自然較大，熒光的信號(hào)自然很容易檢測。這是獲得高信噪比（SNR）的最初始保證。所以，由于有高的信噪比（SNR）保證，濾光片系統(tǒng)從酶標(biāo)儀誕生以來一直就是高靈敏度檢測的黃金標(biāo)準(zhǔn)。我們也不難發(fā)現(xiàn)很多有光柵型酶標(biāo)儀的廠家在一些檢測靈敏度要求比較高的高端應(yīng)用(如：TRF、TR-FRET、等)中，都會(huì)有另外配上濾光片模塊的設(shè)計(jì)。因?yàn)檫@些高端的應(yīng)用，光柵系統(tǒng)未能有滿意的效果或干脆做不到。

2.光柵系統(tǒng)帶來方便，但也有一些缺點(diǎn)?；诠饴吩O(shè)計(jì)的問題，光柵的光能損失比濾片大很多。在熒光檢測中，光源經(jīng)過光柵而成的激發(fā)光已比原來的少了能量。樣本被激發(fā)后會(huì)放出發(fā)射光，發(fā)射光會(huì)透過光柵去分隔出需要的波長。被分隔后的發(fā)射光能量再損失。光柵酶標(biāo)儀的靈敏度沒有濾光片酶標(biāo)儀好的，所以在高端光柵型的酶標(biāo)儀也要配備濾光片模塊才能進(jìn)行TRF、TR-FRET等高靈敏度需求的檢測。

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