PCR熒光分析顯微鏡是由激發(fā)濾光片，二向色鏡以及發(fā)射濾光片組成的光學(xué)儀器，通常被設(shè)計(jì)來(lái)匹配特定熒光團(tuán)或熒光蛋白的光譜。同時(shí)濾光片也可能會(huì)安裝在一個(gè)轉(zhuǎn)輪（稱為濾光片轉(zhuǎn)盤）上組成一個(gè)多通道濾波片組合。

濾光片輪盤您可以混合搭配，盡可能匹配我們所需要的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)。最終的作用是是捕獲到希望從結(jié)合靶標(biāo)的熒光基團(tuán)光束上捕獲的光信號(hào)，同時(shí)盡可能屏蔽其它部分的任何光線（環(huán)境光，激發(fā)光源等）干擾。

PCR熒光成像使用的濾光片有哪些類型呢？

通常情況下，濾光片組被設(shè)計(jì)成可用于捕獲制定熒光團(tuán)的最大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，但不會(huì)捕獲所有的熒光。

多數(shù)現(xiàn)代化濾光片組的設(shè)計(jì)旨在確保激發(fā)濾光片允許制定波長(zhǎng)區(qū)間的光線通過。這種類型的濾光片稱為帶通濾光片。

帶通濾光片通常通過中間波長(zhǎng)和區(qū)間寬度確定。在較為簡(jiǎn)單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線離開激發(fā)濾光片，即會(huì)照射到靶標(biāo)上，靶標(biāo)上的熒光激團(tuán)隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對(duì)于激發(fā)光線）遷移的光線，并非所有此類發(fā)射光線都會(huì)被檢測(cè)器捕獲到——僅哪些允許通過二向色鏡且能通過發(fā)射濾光片的光線。

發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或者長(zhǎng)波通濾光片，具體取決于特定的熒光團(tuán)和成像實(shí)驗(yàn)。如果您希望讓超過特定波長(zhǎng)的光線通過檢測(cè)器，可選擇長(zhǎng)波通濾光片。

一款好的PCR熒光分析通道濾光片在臨床診斷上儀器的穩(wěn)定性和檢測(cè)準(zhǔn)確性、檢測(cè)靈度當(dāng)然是首選的指標(biāo)，在科研上熒光定量PCR其意義在于對(duì)后續(xù)研究的指導(dǎo)性，數(shù)據(jù)越準(zhǔn)確，對(duì)后續(xù)研究的指導(dǎo)性就越高。結(jié)果偏差越大的儀器反而會(huì)誤導(dǎo)用戶。

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